学会观察蘑菇

遇KOH后变黄的中华双环蘑菇Agaricus sinoplacomyces。

氢氧化钾是一种强碱。将氢氧化钾配置成3-10%（通常是5%）的溶液后，可以用于显微观察。氢氧化钾常作为载浮剂，在载玻片上滴加少了氢氧化钾后放置样本和盖玻片，因为碱溶液具有滑腻感，用镊子轻巧后即可“滑开”样本内纠缠在一起的菌丝组织，方便观察。标准的显微观察都是在碱溶液而非水中观察的。切好片的样本在观察前还可以浸泡在氢氧化钾中进行复水。
另外，一些蘑菇遇氢氧化钾有变色现象，例如黄斑蘑菇组物种子实体各部位遇氢氧化钾后明显变黄，碱紫漏斗伞的子实体各部位遇氢氧化钾后明显变紫。变色现象可以用作鉴定依据。
氢氧化钠可以代替氢氧化钾，但传统上喜欢用氢氧化钾，统一使用氢氧化钾有助于避免争议（我曾经测试过碳酸氢钠，它甚至都能表现出类似于氢氧化钾的显色反应，但如果研究蘑菇时用碳酸氢钠做测试必然会引发争议）。
必要性 很有用，有必要准备。
购买 固体氢氧化钾难买到，可以在网上购买配置好的溶液。
使用 显微观察时，将切片浸泡在溶液中一段时间进行复水，然后将氢氧化钾滴加在载玻片上，加入样本，明视野中观察样本的形态。观察显色时，用滴管滴加在蘑菇对应部位上即可。
储存和注意事项 固体和溶液避免储存在玻璃容器中，因为碱可以与玻璃反应，可以储存在塑料容器中。不用时密封储存，防止碱与空气中二氧化碳反应变质。氢氧化钾是强碱，固体避免触摸，低浓度溶液（5%）滴加到手上后需尽快擦去（不必过分慌张，低浓度溶液危害性相对小）。碱会和硫酸亚铁、碘液和其他酸性溶液反应。氢氧化钾废液不可直接排放到下水道，需用酸中和。

硫酸亚铁是一种正二价亚铁盐，正常情况下直接接触对人体无害。将硫酸亚铁配置成溶液后滴加在一些蘑菇的菌盖、菌柄上时会有变色现象，如变柠檬黄色、橄榄绿色、蓝绿色、粉色或灰色等，这可以作为识别蘑菇的依据。据说直接把硫酸亚铁敷在蘑菇上有时也有类似效果。
必要性 不经常使用，可以不准备。
购买 可以在网上购买，搜索“硫酸亚铁”即可。一般购买的是硫酸亚铁的七水合物，性状为淡绿色的粉末。最好不要购买花肥版的硫酸亚铁，而用实验室用的分析纯硫酸亚铁。
使用 配置成10%的水溶液（10g硫酸亚铁溶解在90g水中），然后滴加在蘑菇上。硫酸亚铁在水中容易水解，水解产物则容易被空气中的氧气氧化为正三价铁离子。由于这个愿意，理论上溶解硫酸亚铁菇体得到的是淡绿色溶液，但实际上因为水解和氧化，容易得到浑浊的带黄色调的溶液。建议溶解时加入少量稀盐酸或稀硫酸，以抑制水解，并随配随用，否则放置时间稍长便会发黄产生沉淀。倘若需要长期存放，请不要加酸，而在溶液中加入少量铁钉、铁粉等，以消耗掉溶液被氧化产生的三价铁离子，并尽快使用。为了防止氧化，硫酸亚铁固体应密封避湿保存。硫酸亚铁和氢氧化钾、氨水反应产生沉淀，使硫酸亚铁失效。

氨水是氨气（NH3）的水溶液。一些蘑菇遇氨水后会变色，例如小蘑菇属Micropsalliota在显微镜下，其菌盖表皮色素遇氨水后会变橄榄绿色，可以鉴定蘑菇。
必要性 并非必需品。
购买 网上即可购买。
使用 将浓度10%的氨水滴加在蘑菇的特定部位上，观察变色反应。
储存和注意事项 氨水容易挥发释放出有毒的氨气（NH₃）。低浓度的氨气气味不明显，不容易被察觉，高浓度的氨气具有剧烈刺激性气味，与人体内的α-酮戊二酸结合生成谷氨酸，切断脑等器官的细胞呼吸能量供应，造成中毒。氨水最好存放在密封性良好、避光的棕色试剂瓶中，现买现用。氨水会和碘液、硫酸亚铁和其他酸性溶液反应。氨水和浓碘液反应生成氨合三碘化氮，干燥后变为具有爆炸性的三碘化氮。氨水和硫酸亚铁反应生成沉淀，沉淀掉亚铁离子同时加快亚铁被空气氧化的速度，使硫酸亚铁失效。氨水和酸会发生中和反应，使氨水失效。

碘液主要用于鉴别组织是否为淀粉质。蘑菇中的一些组织是透明的，但在遇到碘液之后会显现出不同的颜色，若显蓝色则此组织为淀粉质（amyloid），若显红褐色则为类糊精质（dextrinoid或pseudoamyloid），若无明显现象或纯粹是碘液的棕黄色则为非淀粉质（inamyloid）。孢子和菌丝是否为淀粉质可以用于鉴别蘑菇种类。注意此方法只能用于透明的孢子和组织。
鉴别蘑菇时所用的碘液主要包括梅氏试剂（Melzer's Reagent，也有梅泽试剂等等各种各样的译名）和鲁戈氏碘液（Lugol’s Solution，也有卢戈氏、鲁哥氏等各种译名）这两种，最常用的是梅氏试剂。它们的配方分别是：
梅氏 0.5g碘单质（I）、1.5g碘化钾（KI）、20g水合三氯乙醛（C₂H₃Cl₃O₂），充分溶解在20ml蒸馏水中。 梅氏试剂有多种配方，例如Singer 1975的配方中用了22g水合三氯乙醛，Langeron版本的配方中用了1g碘化钾，《中国真菌志第五十二卷环柄菇类》中则用了22g水合三氯乙醛和22ml蒸馏水，尽管没有证据表明它们的效果有差异，但最好说明使用了哪种配方。
鲁戈氏 5g碘单质、10g碘化钾，充分溶解在100ml蒸馏水中。
此反应主要利用了碘和淀粉的反应，但碘单质的溶解度很小，因此加入碘化钾、水合三氯乙醛以起到增大碘溶解度的作用。
使用梅氏试剂时需要特别注意，其中的水合三氯乙醛对人体有毒，属于管制物品；这导致梅氏试剂很难购买得到，因此鲁戈氏碘液常被看作为是梅氏试剂的平替。不过一些研究表明，鲁戈氏碘液和梅氏试剂对于同种蘑菇的显色效果有差异，换句话说水合三氯乙醛应该也参与了显色过程。基于这个事实，还可以将淀粉质分为两种，即真淀粉质euamyloid和仅在鲁戈氏碘液中会变色的半淀粉质hemiamyloid，半淀粉质的样本经过KOH预处理后在两种试剂中都变蓝。另外，还有零星的样本在梅氏试剂中淀粉质，在鲁戈氏碘液中无反应，或显现介于无反应和类糊精质之间的褐色反应。

原理 碘液显现出蓝色、红褐色的反应很容易让人联想到碘和直链、支链淀粉的反应——溶解了碘的溶液遇直链淀粉显蓝色，遇支链淀粉显红褐色。碘液染色蘑菇的原理，至少部分与此相同。
真菌的细胞壁主要由几丁质、纤维素、葡聚糖等物质组成，其中可能包含了短链的直链淀粉，遇到碘液中的碘三负离子（I^3-）后会形成深蓝色的络合物，因此显现蓝色，会出现这样反应的组织被称为淀粉质组织。注意，真菌中的直链淀粉并不会像植物那样在细胞质中形成淀粉颗粒，而是夹杂在细胞壁中，并不起到供应能量的作用。
比较反直觉的是，真菌中显红褐色的类糊精质反应可能与支链淀粉无关，而大概率是甘氨酸甜菜碱（glycine betaine）和碘的反应。甘氨酸甜菜碱是部分真菌组织的“组织液”，它遇碘后显红褐色，可能是由于形成红褐色的络合物。水合三氯乙醛似乎能加速这个反应。我个人猜测真菌组织中糖原可能也参与反应（糖原与碘显深棕色）。
必要性 有点用处但不太多。
购买 梅氏试剂买不到，鲁戈氏碘液可以在网上购买配置好的溶液。
使用 滴加在透明的样本上（如组织切片、孢子印等），直接观察颜色或在显微镜下观察颜色。
储存和注意事项 存放在密封玻璃容器中，避免高温或阳光直射，因碘会缓慢挥发出有一定毒性的碘蒸汽，高温会加速这一过程。尽量不要使用塑料容器装碘液，因碘渗透性强，容易穿过塑料，污染周围环境。和氢氧化钾、氨水反应，使碘液失效。碘液不能用碘酒或碘酊（碘的酒精溶液）、碘水（碘的水溶液）、碘伏（聚维酮碘溶液）代替，因为碘液成分是碘单质和碘化钾，后者提供的碘离子和碘单质反应生成碘三负离子，这才是染色的有效成分，而碘酒、碘水、碘伏中缺乏碘离子。

刚果红是一种红色的色素，主要用于显微观察时染色，可以用于染色透明的孢子、组织等，使其轮廓更清晰，方便测量长宽。
一般使用1%的溶液。
必要性 并非必需品。
购买 网上可购买配置好的1%溶液，也可以买到纯刚果红，自行将1g色素溶解在99ml蒸馏水中即可。
使用 在显微观察时，盖上盖玻片后，将染色剂滴加在盖玻片一侧，在另一侧用吸水纸吸引，让色素浸润样本。
储存和注意事项最好储存在棕色试剂瓶中。刚果红遇酸会变蓝色，在正常显微观察时（以中性的水或碱性的碱溶液作为基液时）应该不会出现此类情况。

和刚果红类似，甲酚蓝是一种蓝色的色素，但它主要用于测试孢子壁是否分层。一些蘑菇的内孢子壁遇甲酚蓝后会变红，这种现象称为“metachromatic in Cresyl Blue”。例如，白鬼伞和白环蘑的孢子便会有此类现象。
一般使用0.5-1%的溶液。
购买 网上可购买配置好的溶液，也可以买到纯甲酚蓝，自行将0.5-1g色素溶解在99-99.5ml蒸馏水中即可。
使用 同刚果红。
储存和注意事项最好储存在棕色试剂瓶中。